Antibody Against Oxidized Low-Density Lipoprotein in Non-Insulin Dependent Diabetes Mellitus

Ihm, Sung Hee; Yoo, Hyung Joon; Park, Sung Woo; Ihm, Jahei

Original Article

Journal of the Korean Geriatrics Society 1998;2(2):30-37.
Published online December 31, 1998.

Antibody Against Oxidized Low-Density Lipoprotein in Non-Insulin Dependent Diabetes Mellitus

Sung Hee Ihm, Hyung Joon Yoo, Sung Woo Park, Jahei Ihm

당뇨병 환자에서 항산화 저밀도지단백 항체 측정

Abstract

BACKGROUND
: Diabetes is an independent risk factor in the development of atherosclerosis. Oxidation of low-density lipoprotein is considered to be an important step in the pathogenesis of atherosclerosis. The purpose of the present study was to investigate the occurrence of in vivo LDL oxidation in diabetic patients by measuring antibody against oxidized LDL.
METHODS
: Plasma samples from 64 NIDDM patients and 30 normal controls were tested for antibody against oxidized LDL by two ELISA methods and for plasma lipid hydroperoxides by the ferrous oxidation with xylenol orange (FOX II) assay. In the first ELISA, antibody levels were estimated as the difference in binding to copperoxidized LDL between untreated plasma and plasma preabsorbed with oxidized LDL. In the second ELISA, antibody levels were estimated as the ratio of IgG binding to copper-oxidized LDL to native LDL.
RESULTS
: There was no significant difference in levels of antibodies to copper-oxidized LDL between NIDDM patients and normal controls with both ELISA methods. There was also no significant difference in levels of antibodies to copper-oxidized LDL between NIDDM patients with ischemic heart disease (n=24) and NIDDM patients without ischemic heart disease (n=40). Plasma lipid hydroperoxides in the diabetic group were significantly higher than in the control.
CONCLUSION
: The present study shows that antibodies to copper-oxidized LDL are not significantly raised in our NIDDM patients. Further study to measure antibodies to malondialdehydeLDL would be necessary.

Key Words: Oxidized low-density lipoprotein, Antibody, Diabetes mellitus

초 록

배경: 저밀도 지단백의 산화 변형은 죽상경화증 발생에 중요한 역할을 함이 알려져 있는데, 당뇨병에서 고혈당과 연관되어 증가된 산화 스트레스는 직접 혹은 지단백 산화를 통하여 당뇨병 환자에서 관찰되는 죽상경화증의 가속화에 관련될 수 있다. 산화 변형된 저밀도 지단백은 항원으로 작용하여 세포매개성 면역 반응과 항체를 유발함으로써 죽상경화증의 진행에 기여할 것으로 여겨지는데, 최근 당뇨병 환자에서 산화된 저밀도 지단백에 대한 자가항체가 정상인에 비해 더 높은 역가로 측정됨이 보고된 바 있다. 본 연구에서는 항산화저밀도지단백 항체를 측정하기 위한 ELISA 방법을 확립하고, 인슐린비의존형 당뇨병 환자에서 허혈성 심질환 유무에 따른 차이가 있는지 알아보고자 하였다.

방법: 항산화저밀도지단백 항체는 시험관 내에서 CuSO₄로 산화시킨 저밀도 지단백을 이용하여 두 가지 ELISA 방법으로 측정하였다. 첫째, microtiter plate에 산화 저밀도 지단백을 항원으로 흡착시킨 뒤, 미리 산화 저밀도 지단백과 반응(absorption)시킨 혈장과 반응 안시킨 혈장을 각각 가한 후 anti-human IgG와 발색 반응을 이용하여 흡광도의 차이를 계산하였다. 둘째, microtiter plate에 저밀도 지단백과 산화 저밀도 지단백을 각각 항원으로 흡착시킨 뒤, 측정하려는 혈장을 가한 후 anti-human IgG와 발색반응을 이용하여 흡광도의 비를 계산하였다. 이들 대상에서 혈장 지질 hydroperoxides치를 FOX Ⅱ방법으로 측정하였다.

결과: 정상 대조군(n=30)과 인슐린비의존형 당뇨병 환자군(n=64)의 혈장에서 이 두 방법으로 항산화 LDL 항체를 측정한 결과 양군간에 유의한 차이를 발견할 수 없었다. 또한, 허혈성 심질환이 동반된 인슐린비의존형 당뇨병 환자군(n=24)과 동반되지 않은 인슐린비의존형 당뇨병 환자군(n=40)사이에서도 유의한 차이가 관찰되지 않았다. 혈장 지질 hydroperoxides치는 인슐린비의존형 당뇨병 환자군에서 정상 대조군보다 유의하게 높았다.

결론: 인슐린비의존형 당뇨병 환자에서 시험관 내에서 구리 이온으로 산화시킨 저밀도지단백에 대한 항체는 본 ELISA 방법들로는 증가되어 있지 않았고, 앞으로 malondialdehyde로 변형된 저밀도지단백을 항원으로 이용하는 측정 등 더 연구할 필요가 있다고 생각된다.